一、服務(wù)簡(jiǎn)介
ELISA-酶聯(lián)免疫吸附法是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用廣泛的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測(cè)大分子抗原,后者用于測(cè)定特異抗體。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
二、技術(shù)流程
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
(2)用脫脂奶粉或BSA進(jìn)行封閉。洗滌除去多余的脫脂奶粉或BSA。
(3)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間,讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
(4)加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
(5)加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。
三、服務(wù)說(shuō)明
1. 客戶須在實(shí)驗(yàn)開始前確保其提供材料的數(shù)量和質(zhì)量,并提供相關(guān)信息,客戶應(yīng)當(dāng)清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定;
2. 客戶需提供ELISA檢測(cè)試劑盒、檢測(cè)用抗原/抗體等,也可委托本公司代購(gòu);
3. 客戶提供血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織或尿液等樣本,檢測(cè)的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動(dòng)物的血清、血漿時(shí),樣本收集后應(yīng)立即-20度保存,若長(zhǎng)期保存應(yīng)-80度保存,具體取材、保存及運(yùn)輸注意事項(xiàng)可來(lái)電咨詢;
4. 樣本量的要求:若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測(cè)應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測(cè)應(yīng)不少于120ul。建議若客戶樣本量充足最好提供500ul以上;
四、成果展示
五、詢價(jià)及訂購(gòu)
感謝您選擇我公司的ELISA-酶聯(lián)免疫吸附服務(wù)。如有相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)聯(lián)系我們的工作人員。